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本研究旨在探讨积雪草酸对沙门菌性结肠炎的预防效果及作用机制,为开发新的中兽药提供依据。选取24只BALB/c小鼠,随机分为对照组、沙门菌感染组和积雪草酸干预组,先给药7 d,其中对照组和沙门菌感染组灌服生理盐水,积雪草酸干预组灌服质量浓度为0.4 mg/mL的药物,剂量为10 mg/kg;第8天,对照组继续灌服生理盐水,沙门菌感染组和积雪草酸干预组灌服鼠伤寒沙门菌菌液,每只小鼠剂量为1×10~9cfu。观察积雪草酸干预对沙门菌感染诱导的小鼠结肠损伤、炎症因子表达、肠道黏膜屏障功能和基因表达等方面的影响。H-E染色结果显示,积雪草酸可有效缓解沙门菌诱导的小鼠结肠的隐窝长度缩短、炎症细胞浸润和充血现象;PAS染色结果显示,积雪草酸可缓解沙门菌引起的小鼠结肠杯状细胞数量减少;荧光定量PCR结果显示,积雪草酸可显著抑制沙门菌引起的IL-6、IL-1β和TNF-α mRNA表达量升高(P<0.05);Western blot结果显示,积雪草酸可有效抑止沙门菌诱导的紧密连接蛋白claudin-2和claudin-7的低表达(P<0.05);转录组测序结果显示,积雪草酸可部分回调沙门菌引起的基因异常表达,并且与炎症和离子跨膜转运途径相关。以上结果提示,积雪草酸可缓解沙门菌诱导的结肠炎损伤。
以引种的叶桑和果桑为材料,研究不同采收期叶桑和果桑叶片中营养物质、活性成分及抗氧化活性,旨在为适时采收提供理论依据。采用紫外分光光度法测定叶片中蛋白质、叶绿素、多酚、黄酮、多糖、γ-氨基丁酸的含量,利用高效液相色谱法测定叶片中芦丁含量,并研究叶片乙醇提取液和叶片中多糖和黄酮成分对几种自由基的清除作用,通过主成分和相关性分析,表征不同采收期叶桑和果桑中活性物质的差异以及活性成分与自由基清除之间的相关性。结果表明,5个采收期叶桑和果桑营养物质、活性成分与抗氧化活性差异较大,蛋白质、叶绿素、多酚含量均在10月、8月、6月最高,8月采收果桑、9月采收叶桑中芦丁含量最高,8月采收叶桑、9月采收果桑叶片中γ-氨基丁酸含量最高,9月和10月果桑、8月和9月叶桑中黄酮和多糖含量均为最高值。对2种特征值大于1的主成分进行分析,累计方差贡献率达79.330%,叶桑综合得分高于果桑,叶桑在8月、6月、9月、7月、10月,而果桑在9月、6月、8月、7月、10月的综合得分依次降低。抗氧化试验显示,叶桑对DPPH·、ABTS~+·清除率逐渐降低,而果桑对DPPH·、ABTS~+·清除率先降低、后升高、再降低,叶桑和果桑对·OH清除率趋势不明显,叶桑对O_2~-自由基清除率先升高、后低降,而果桑对O_2~-自由基清除率逐渐升高,多酚、黄酮和多糖的含量与抗氧化活性呈极显著正相关或显著正相关。综合考虑,张掖地区引种的叶桑在8月、果桑在9月为最佳采收期。
本试验旨在评价短尾噬菌体P6对多重耐药沙门菌的抑制作用,为探讨新型抗菌策略提供依据。通过双层琼脂平板法和96孔板结晶紫染色法,系统评价噬菌体P6对43株浮游态和生物膜态的多重耐药鼠伤寒沙门菌和肠炎沙门菌的抑制作用。结果显示,噬菌体P6对51.2%(22/43)的浮游态耐药性沙门菌试验菌株具有裂解作用,其中对肠炎沙门菌的裂解率为40.0%(4/10),对鼠伤寒沙门菌的裂解率则为54.5%(18/33)。43株沙门菌最普遍的耐药谱为PG-AMX-AMP-STR(44.2%),噬菌体P6对高达93.8%(15/16)的耐药谱为PG-AMX-AMP-STR的沙门菌试验菌株具有裂解作用。同时,裂解型噬菌体P6可通过降解生物膜外聚合物而发挥对多重耐药沙门菌生物膜的抑制作用,噬菌体P6在3 h内对沙门菌生物膜减少率为11.2%~88.6%,其中最高可减少肠炎沙门菌试验菌株78.4%的生物膜和鼠伤寒沙门菌试验菌株88.6%的生物膜,噬菌体P6对鼠伤寒沙门菌的平均生物膜减少率为45.2%,对肠炎沙门菌的平均生物膜减少率为64.4%。本试验证明了噬菌体P6对两种血清型的浮游态和生物膜态多重耐药沙门菌均具有一定的抑制效果,为噬菌体疗法的优化和推广提供了重要数据支持,同时也为噬菌体与其他抗菌剂的联合应用奠定了基础。
研究张掖地区中药材及对应根际土中重金属及有害元素的迁移转化规律,对种植品种及种植区域进行风险识别,为种植户预警潜在的污染风险,指导科学选种选地。采集张掖市中药材主产区内的板蓝根、当归、黄芪及其对应的根系土样品,采用原子吸收光谱法、原子荧光光谱法对药材及对应的根系土中的铅(Pb)、镉(Cd)、砷(As)、汞(Hg)、铜(Cu)含量进行测定。利用Origin分析软件,结合主成分分析、相关性分析、生物富集系数评价法等多元分析方法对测定结果进行分析。主成分分析表明,药材中5种重金属元素含量存在显著差异,根际土中5种重金属元素含量无显著性差异;相关性分析表明,Pb、As、Hg、Cu元素在土壤-药材之间无相关性,Cd元素呈正相关;生物富集系数评价结果表明,药材中5种元素的生物富集系数值均小于1。因此,张掖市主产区5种重金属元素在板蓝根、当归、黄芪中无明显的富集效应,在张掖种植这些品种污染风险小,张掖可作为这些品种的良好种植地。
本研究通过单因素试验结合响应面法,以黄芩总黄酮提取率为评价指标,筛选黄芩总黄酮的最佳超声提取工艺。试验采用超声辅助提取技术配合亚硝酸钠-硝酸铝显色法定量分析,通过单因素试验考察料液比、乙醇浓度、提取时间及超声温度对黄芩总黄酮提取率的影响,根据试验结果,选取料液比、乙醇浓度和超声温度3个显著性因素作为响应面设计的核心变量。同时,通过DPPH·和ABTS~+·等自由基清除试验评价黄芩总黄酮体外抗氧化活性。结果表明,最佳工艺参数组合为料液比1∶20(g∶mL)、乙醇浓度60%、超声温度50℃、提取时间50 min,此时黄芩总黄酮得率达8.47%,与模型预测值吻合,工艺稳定可靠;当质量浓度为800 mg/L时,提取物对DPPH·和ABTS~+·的清除率分别达88.13%和75.13%,表明黄芩总黄酮具有显著的体外抗氧化活性。本研究为黄芩总黄酮的高效提取及后续药物开发提供了理论基础与数据支持。
生物细胞中大部分生命活动是由蛋白质来执行和完成,NF-κB不仅是一个关键转录因子,在多种生物过程中扮演着重要角色,包括免疫反应、细胞增殖和细胞凋亡等。其中NF-κB信号通路作为经典的炎症反应通路,在抗天然免疫中发挥重要作用,参与各种信号传导机制、生物过程与疾病的预防和治疗,使得NF-κB在维持免疫稳态中至关重要,细菌感染、病毒入侵等可激活该通路。基于此,本文系统综述了NF-κB家族蛋白(NF-κB1、NF-κB2、RelA、c-Rel和RelB)的作用,以及NF-κB信号通路经典途径和非经典途径2种激活途径。经典途径可快速而短暂地调节转录活性,主要负责调控多种促炎基因的表达,并在炎症反应中发挥关键作用;非经典途径则通过少数肿瘤坏死因子受体超家族成员激活,具有持久性,与其在免疫细胞发育、淋巴器官形成及免疫稳态中的生物功能密切相关。本文可为研究NF-κB家族蛋白与宿主免疫蛋白相互作用的分子机制提供理论依据,为研究NF-κB信号通路的多重功能及其与其他信号通路的相互作用奠定基础,也将为研究者提供更全面的生物学视角,有助于理解NF-κB家族蛋白在健康和疾病中的重要性,对于开发新的治疗策略具有重要意义。
高脂血症是脂肪肝和心血管等疾病的诱发因素之一,脂质沉积可加剧脂肪肝的发生发展,诱导动脉粥样硬化,严重危及健康。高胆固醇血症是具有代表性的一类高脂血症,胆固醇不能直接排出体外,需代谢为胆汁酸后随粪便排泄。胆汁酸肠肝循环是维持胆汁酸代谢稳态的重要一环,通过调节胆汁酸代谢,进而降低机体胆固醇水平是开发降血脂药的思路之一。胆汁酸转运体及其调控因子的激动剂/抑制剂可通过影响胆汁酸转运体的活性或表达而抑制胆汁酸重吸收,降低肝脏胆汁酸负荷,负反馈调节胆固醇向胆汁酸的转化,从而改善血脂水平。胆汁酸肠肝循环主要由胆盐输出泵(BSEP)、Na~+-牛磺胆酸钠协同转运肽(NTCP)、顶端钠依赖性胆汁酸转运体(ASBT)、肠胆汁酸结合蛋白(IBABP)、有机溶质转运体α/β(OSTα/β)介导,并被法尼醇X受体(FXR)、肠道菌群等调控。其中ASBT和NTCP是较受关注的胆汁酸转运体,其抑制剂是用于血脂调节的研究热点之一。ASBT抑制剂作为降血脂药物具有良好的开发潜力,同时因其可减少肠道胆汁酸重吸收,使肠道保持润滑,对特殊群体的血脂改善具有重要意义。目前已有多种不同靶点的降血脂药物应用于人医临床,并且表现出良好的临床效果。但在国内兽药领域,尚缺乏动物专用的降血脂药物。因此,深入探讨胆汁酸肠肝循环转运体调控机制,探索新的降血脂作用靶点,可为动物用降血脂药物开发提供更多参考。
本研究旨在建立肉苁蓉种子质量评价方法,并制定肉苁蓉种子质量等级分级标准。以酒泉地产的10批肉苁蓉种子为研究对象,通过对肉苁蓉种子的形态特征、长度、宽度、净度、千粒重、含水量、发芽率等指标进行测定,并采用相关性分析和聚类分析对各项指标数据进行分析,结合生产实践,制定了肉苁蓉种子的质量等级分级标准。结果显示,肉苁蓉种子可划分为3个等级,Ⅰ级种子分级标准为发芽率≥80%、净度≥85%、千粒重≥0.11 g、含水量≤4.0%,Ⅱ级种子分级标准为55%<发芽率<80%、70%<净度<85%、0.80 g<千粒重<0.11 g、4.0%<含水量<6.0%,Ⅲ级种子分级标准为发芽率≤55%、净度≤70%、千粒重≤0.80 g、含水量≥6.0%。本研究为肉苁蓉种子质量评价体系的建立提供了科学依据,有助于推动肉苁蓉人工种植产业的健康发展。
建立超临界流体色谱技术(SFC)测定富马酸贝达喹啉中对映异构体杂质的方法。采用CHIRALPAK~?IC-3(4.6 mm×150.0 mm,3μm)色谱柱,以CO_2为流动相A,流动相B为混合液(750 mL异丙醇+250 mL乙腈+2 mL氨水),梯度洗脱,检测器为紫外检测器,流速为2.5 mL/min。结果显示,对映异构体在0.498 5~5.981 6μg/mL范围内线性关系良好,相关系数r=0.999 6,方法的检测限浓度为0.149 6μg/mL,定量限浓度为0.498 5μg/mL,加样回收率为94.97%~102.74%。结果提示该方法简便、灵敏、快速,可以准确测定富马酸贝达喹啉中对映异构体。
本研究旨在评估定西市人工栽培淫羊藿的质量。收集定西市不同产区的淫羊藿栽培品,并以当地野生淫羊藿样品作为参比。运用HPLC-DAD指纹图谱技术,结合相似度分析,定性研究人工栽培对淫羊藿中化学成分的影响;通过共有峰主成分分析,定量评估不同产区间淫羊藿质量差异。结果显示,HPLC指纹图谱共标定出16个共有峰,样品间平均相似度达到0.953。主成分分析采用4种主要成分,累计方差贡献率达90.348%。根据权重系数计算得分排序为渭源县栽培品>岷县栽培品>野生样品>漳县栽培品>陇西县栽培品;按照2020年版《中华人民共和国药典》进行含量测定,所有样品含量值均高于药典要求。通过HPLC指纹图谱结合主成分分析、含量测定,客观、全面、有效地对定西淫羊藿质量进行分析,其中渭源县和岷县淫羊藿栽培品质量最佳,为淫羊藿的人工栽培技术优化提供了科学参考。
采用薄层色谱法对自研胆芩翘口服液中猪胆粉、黄芩提取物、连翘提取物进行定性分析,采用高效液相色谱法测定制剂中主要成分猪胆粉(猪去氧胆酸与鹅去氧胆酸)和黄芩提取物(黄芩苷)的含量。结果显示,薄层色谱斑点清晰可见,分离效果良好,阴性对照样品无干扰。猪去氧胆酸、鹅去氧胆酸、黄芩苷分别在0.2~0.6 mg/mL、0.2~0.6 mg/mL、0.025~0.125 mg/mL范围内与峰面积呈良好的线性关系,回收率RSD分别为0.74%、0.61%、0.40%。本试验建立的定性与定量分析方法操作简单,结果准确可靠,可用于胆芩翘口服液中猪胆粉、黄芩提取物、连翘提取物的鉴别以及猪去氧胆酸、鹅去氧胆酸和黄芩苷的含量测定。
建立黄参中31种微量元素的微波消解-电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)测定方法,对11批黄参中31种微量元素进行检测,初步探索研究黄参所含微量元素种类及含量,并分析黄参重金属及有害元素污染分布情况。采用微波消解法对样品进行前处理,通过采用在线内标校正与外标法定量ICP-MS法同时测定黄参中31种微量元素的含量。结果显示,铜(Cu)、铝(Al)、铁(Fe)、锰(Mn)、钡(Ba)、锌(Zn)、锶(Sr)在1~1 000 ng/mL,金(Au)、锂(Li)、砷(As)、镉(Cd)、铈(Ce)、钴(Co)、铬(Cr)、铯(Cs)、镍(Ni)、碘(I)、镧(La)、铅(Pb)、银(Ag)、钒(V)、钨(W)、钼(Mo)、钛(Ti)、铂(Pt)、锑(Sb)、硒(Se)、钇(Y)、铊(Tl)、碲(Te)、锡(Sn)在0.05~25.00 ng/mL范围内,各元素质量浓度与响应强度具有良好的线性关系(相关系数R≥0.995 0);在高、中、低3个水平下,各元素的平均回收率为87.5%~104.5%,精密度试验RSD≤2.0%,重复性试验RSD≤2.2%。黄参中元素含量从高到低依次为Fe>Al>Sr>Mn>Ti>Zn>Cu>Ba>Ni>V>Ce>I>Mo>Co>Cr>La>Pb>As>Ag>Sn=Y>Cs>Te>Au>W=Se>Cd;未检出Li、Pt、Sb、Tl等元素;重金属及有害元素铅(Pb)、镉(Cd)、砷(As)、铜(Cu)含量均在限度范围内,污染风险较小。该方法可同时检测黄参中多种微量元素,具有灵敏度高、重现性好、检测时间短、检测成本低等优点,可为黄参产品质量控制、安全风险评估及产业高质量发展提供理论支撑。
本研究旨在通过高效液相色谱-三重四极杆质谱(HPLC-MS/MS)构建阿哌沙班中氨基物杂质含量的检测方法。试验选用Agilent Eclipse Plus C_(18)色谱柱,以0.1%甲酸溶液和乙腈为流动相进行梯度洗脱,采用质谱检测器,流速为0.4 mL/min。结果表明,阿哌沙班中氨基物杂质在1~20 ng/mL质量浓度区间呈良好的线性关系,相关系数r均大于0.999 0;该方法的检测限为0.3 ng/mL,定量限为1.0 ng/mL,精密度和准确度回收率为95.20%~104.40%,RSD均小于3.0%。此方法操作简便、灵敏、高效,可以准确地定量测定阿哌沙班中氨基物杂质的含量。
食道异物梗阻是由异物滞留食道腔引发的机械性阻塞,临床以吞咽困难、流涎及呕吐为主要症状,严重者可导致食道穿孔。食道异物梗阻的治疗需根据异物位置、堵塞程度施行内窥镜辅助取出术或外科手术,术后需对症治疗。1只6月龄法国斗牛犬因不食、频繁呕吐就诊,经临床检查、影像学检查,确诊为犬食道异物梗阻,实施外科手术取出异物后,经输液支持疗法治疗3 d,患犬仍无饮食欲,给予少量饮水后仍有呕逆反应。钡餐造影及开腹探查均无异常;X线检查显示胃臌气。根据中兽医辨证,确诊为脾失健运、胃气不降。遂艾灸命门(DU 4)、肾俞(BL 23)、百会(DU 20)和足三里穴(ST 36),以温肾助阳、调畅气机,每日1次,每次20 min;配合猪骨萝卜汤温中补虚、行气消胀,少量多次灌服。用中兽医方法治疗后1 d,患犬排出体内多余气体,治疗后3 d患犬可自主进食,复查显示患犬胃肠功能恢复。本病例采用中西医结合的方法进行诊治,效果良好,可为小动物食道异物梗阻的临床治疗提供参考。
绵羊肺腺瘤病是由绵羊肺腺瘤病毒引起的一种慢性、进行性、接触性肺脏肿瘤疾病,发病后死亡率为100%。由于本病目前无疫苗预防,且应用现有的抗病毒药物治疗收效甚微,发病羊场多进行全群淘汰,对畜主造成巨大的经济损失。甘肃省宁县某养殖场羊群于2024年4月出现咳喘、流涕、呼吸困难等症状,剖检发现病羊肺脏出现结节、水肿、肉样变等病理变化。根据病羊临床症状、病理变化,结合病羊鼻拭子RT-PCR病原检测结果,确诊为绵羊肺腺瘤病。经中兽医辨证诊断为风寒束肺、脾肺气虚证,采用党参、荆芥、柴胡、枳壳、甘草、苦杏仁等中药组成的复方对羊群进行治疗。结果表明,该复方能有效控制本病,为绵羊肺腺瘤病的诊断和防治提供了参考。
动物保护与福利是维护动物的生存环境,满足动物基本的自然需求,保护动物健康和幸福的一门课程。该课程在保护生物多样性、促进畜牧业可持续发展、保障公共卫生安全、同一健康、科学伦理等方面均具有重要意义。但该课程内容较为枯燥,授课效果亟待提高。案例教学法可以提高学生分析问题和解决问题的能力,以案例库为基础的专业学位研究生教学是当前教学改革的重要方式。本课程的案例库从动物保护与福利的内涵及意义、动物福利与畜禽生产、动物福利与人类健康、动物保护评价与立法、动物品种资源的保护、农场动物(家畜与家禽)福利、实验动物的保护与福利、伴侣动物的保护与福利等方面,筛选与兽医专业学位研究生培养相关的特色案例,以实验动物标准化建设、动物实验前的论证、动物实验时应遵循“3R”原则、农场动物养殖过程中存在的福利问题、人兽共患病、动物源性食品安全、伴侣动物护佑、安徽地方优良畜禽品种的保护等案例为授课点,科学建设案例库,突出农业院校特色和地方特色。通过案例库建设,旨在提高研究生课堂教学效果,提升研究生的知识水平和能力水平。